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>糖化血清蛋白注意事项
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(1)DMF可以自己合成,方法是称取无水D-葡萄糖90g,吗啡啉58g,加蒸馏水1L,溶解后在60~70℃水浴上搅拌,开始为黄色糊状物,后颜色逐渐加深。20min后,移去水浴,缓慢地加入丙二酸18g,整个加入过程需在10min以上。再置水浴并使温度上升至80℃,不断搅拌,颜色由黄绿色转变为琥珀色。10min后,加无水乙醇70ml,维持75℃30min,再加入丙酮70ml。此时可见到结晶析出,此即为DMF。放4℃冰箱过夜。收集结晶,并用无水乙醇重结晶3次,使产物脱色纯化,干燥备用。熔点146~147℃,分子式C10H19O6N,分子量249D。 (2)pH值、反应温度、反应时间对本试验影响较大,必须严格控制。 (3)血清蛋白经非酶促糖化反应可形成酮胺结构。DMF在适当的pH值及温度条件下,经过结构重排也可以由氧环式结构形成1-脱氧-1-氨基-2-酮基的酮胺结构。因此用它作为标准参照物是合理的。 (4)用定值冻干糖化血清蛋白作标准,测定结果更稳定。因为用不同标准物时所测得结果不完全一致,最好建立实验室的参考值。
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